綠膿桿菌在自然界中的水、空氣和土壤中均有存在,可產生多種外毒素和內毒素,常引起人皮膚化膿感染。因此,水和化妝品常需檢測銅綠假單胞菌。在《GB/T 7918.4-1987 化妝品微生物標準檢驗方法 綠膿桿菌》中規定,化妝品不得檢出銅綠假單胞菌。
對銅綠假單胞菌分離選擇用培養基在國標中有具體的規定。但近年來,隨著顯色培養基的逐步使用,顯色培養基的優勢逐漸顯現出來。它利用細菌特異性酶與顯色底物發生反應,直接通過菌落有暗色初步鑒別微生物,已成為一種非常實用的新型快速分離方法。
有人對傳統分離選擇培養基(如CN選擇培養基,十六烷*基溴化胺瓊脂,乙酰胺瓊脂,CFC瓊脂)進行過檢測和評論1,發現在CN、CFC 培養基上,銅
綠假單胞菌呈黃綠色,惡臭假單胞菌呈黃色,兩類菌顏色相近,并不容易區分,因此會增大鑒定工作量。十六烷*基溴化銨瓊脂上,銅綠假單胞菌與惡臭假單胞菌形態顏色均相似,不適宜作為選擇性培養基使用。乙酰胺瓊脂、假單胞菌顯色培養基能明顯將銅綠假單胞與惡臭假單胞菌、熒光假單胞菌區分開,但乙酰胺瓊脂上目標菌菌落較小,可能會影響實驗結果觀察與分離。
因而,作者認為,十六烷*基溴化胺瓊脂培養基對假單胞菌屬特異性較差,CFC 瓊脂選擇性較弱,而乙酰胺瓊脂則存在目標菌生長速度過慢,增菌時間長,缺乏時效性等問題,且 CN 選擇性培養基在樣品污染量大時,容易出現菌落成片無法計數的情況。
HiMedia公司開發的綠膿桿菌顯色培養基,系用熒光法分離銅綠假單胞菌。銅綠假單胞菌分泌幾種色素,包括綠膿素(藍綠色)、熒光素(黃綠色,發熒光)、紅膿素(棕紅色)。King等人開發了King A培養基,用于提高綠膿素和紅膿素的產出,以及King B 培養基用于提升熒光素的產出。該顯色培養基用植物源蛋白胨取代動物蛋白胨,并基于King 等人的配方而成(熒光混合劑除外)。培養基中的溴棕*銨抑制其他菌群生長。它作為季銨類化合物和陽離子表面活性劑,使銅綠假單胞菌之外的細菌菌體釋放出氮和磷。銅綠假單胞菌裂解熒光底物,使UV下發射熒光。
在該培養基中,銅綠假單胞菌UV下發出熒光(下圖),而嗜麥芽窄食單胞菌、金黃色葡萄球菌、大腸桿菌均被抑制。
HiMedia公司是微生物產品生產商,一直致力于微生物培養基和細胞培養基的研發和生產,具有WHO GMP認證、ISO9001:2008,ISO13485:2003認證,CE認證和FDA注冊登記,尤其通過CE的體外診斷注冊。其產品行銷140多個國家。
締一生物作為HiMedia公司在中國的代理商,在微生物培養和檢測領域,一如既往地為您帶來的服務。
參考文獻
1. 伊鋆,何平,楊明,盧躍鵬,酈娟,江小明. 五種選擇性培養基檢測銅綠假單胞菌效果比較. 現代預防醫學. 2017, 44(15): 2829-2835